Nitro-blaues Tetrazolium ist eine chemische Verbindung aus zwei Tetrazoleinheiten. Es wird in der Immunologie zum empfindlichen Nachweis alkalischer Phosphatase (mit BCIP) eingesetzt. NBT dient als Oxidationsmittel und BCIP ist das AP-Substrat (und ergibt auch dunkelblauen Farbstoff).
Klinische Bedeutung [ edit ]
In der Immunhistochemie wird alkalische Phosphatase häufig als Marker verwendet, der an einen Antikörper konjugiert ist. Das farbige Produkt kann entweder aus der NBT / BCIP-Reaktion stammen, wo der Antikörper gebunden ist, oder es kann bei der Immunfluoreszenz verwendet werden. [1]
Die NBT / BCIP-Reaktion wird auch für colorimetrische / spektrophotometrische Aktivitätstests von Oxidoreduktasen verwendet. Eine Anwendung sind Aktivitätsflecken in der Gelelektrophorese, beispielsweise bei mitochondrialen Elektronentransportketten-Komplexen. [2]
Nitro-Blau-Tetrazolium wird in einem diagnostischen Test verwendet, [3] insbesondere bei chronischen granulomatösen Erkrankungen und anderen Erkrankungen der Phagozytenfunktion. Wenn ein NADPH-Oxidasedefekt vorliegt, kann der Phagozyt keine reaktiven Sauerstoffspezies oder -radikale bilden, die für das Abtöten von Bakterien erforderlich sind. Infolgedessen können Bakterien innerhalb des Phagozyten gedeihen. Je höher der blaue Wert, desto besser ist die Zelle in der Herstellung reaktiver Sauerstoffspezies. [4]
Literatur [ edit
- ^ M, Fraser SE, Bumm, LA, McCauley, DW (Juni 2007). "Fluoreszierende In-situ-Hybridisierung unter Verwendung der herkömmlichen chromogenen NBT / BCIP-Färbung". BioTechniques . 42 (6): 756–9. doi: 10.2144 / 000112476 . PMID 17612300.
- ^ Nisimoto Y, Wilson E., Heyl BL, Lambeth JD (5. Januar 1986). "NADH-Dehydrogenase aus Rinder-Neutrophilen-Membranen. Reinigung und Eigenschaften". J. Biol. Chem . 261 (1): 285–90. PMID 3941077.
- ^ Freeman, R; König B (Oktober 1972). "Technik für die Durchführung des Tests mit Nitroblau-Tetrazolium (NBT)". Journal of Clinical Pathology . 25 (10): 912–914. doi: 10.1136 / jcp.25.10.912. PMC 477548 . PMID 4119008.
- ^ Nathan DG, RL Baehner, Weaver DK (Oktober 1969). "Versagen der Reduktion von Nitro-Blau-Tetrazolium in den phagozytischen Vakuolen von Leukozyten bei chronischer granulomatöser Erkrankung". J. Clin. Invest . 48 (10): 1895–904. doi: 10.1172 / JCI106156. PMC 322426 . PMID 5387730.
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